Tšebeliso ea Spectrophotometer ea UV-Vis
Selelekela
Spectrophotometry ea Ultraviolet-Visible (UV-Vis) ke mokhoa o feto-fetohang oa tlhahlobo o sebelisoang haholo lipatlisisong tsa saense, lits'ebetsong tsa indasteri, le ho latela melaoana. Mokhoa ona o sebelisa limolek'hule le li-ion ho monngoa ha leseli libakeng tsa ultraviolet (UV) le tse bonahalang (Vis) tsa spectrum ea electromagnetic ho fana ka tlhaiso-leseling ea bongata le boleng mabapi le sampole. Sengoloa sena se hlahloba melao-motheo, lisebelisoa, lits'ebetso le melemo ea ho sebelisa spectrophotometry ea UV-Vis, e bonts'a karolo ea eona ea bohlokoa masimong a fapaneng.
Melao-motheo ea UV-Vis Spectrophotometry
Motheong oa eona, spectrophotometry ea UV-Vis e thehiloe Molaong oa Beer-Lambert, o bolelang hore ho monngoa ha leseli (A) ke sampole ho lekana ka ho toba le mahloriso (c) a mofuta o monyang, bolelele ba tsela (l) ea sele ea sampole, le monyelo oa molar (ε), e leng ntho e sa fetoheng e ka hare ho ntho ena ka bolelele ba leqhubu bo fanoeng. Ka lipalo, sena se hlalosoa ka tsela ena:
\[ A = ε \cdot c \cdot l \]
Kamano ena e dumella bo-rasaense ho fumana hore na ntho e ka har'a tharollo e kae ka ho lekanya ho monya ha khanya ka bolelele bo itseng ba leqhubu. Mokhoa ona o kenyelletsa ho fetisa khanya ka har'a sampole le ho lekanya matla pele (I₀) le ka mor'a hore (I) e fete ka har'a sampole. Ebe ho monya ho baloa ka tsela ena:
\[ A = -\log \left(\frac{I}{I₀}\right) \]
Instrumentation
Spektrophotometer e tloaelehileng ea UV-Vis e na le likarolo tse 'maloa tsa bohlokoa:
1. Mohloli oa Leseli: Ka kakaretso lebone la deuterium bakeng sa sebaka sa UV (190-400 nm) le lebone la tungsten-halogen bakeng sa sebaka se bonahalang (400-700 nm). Mabone a Xenon le 'ona a sebelisoa ka lebaka la mefuta e mengata ea tlhahiso ea 'ona.
2. Monochromator: E sebedisa diprism kapa di-diffraction gratings ho arola maqhubu a lesedi ka bomong ho tswa ho tlhahiso e pharaletseng ya mohlodi wa lesedi.
3. Setshwari sa Sampole: Cuvette, eo hangata e entsweng ka quartz kapa khalase, e tshwere tharollo ya sampole. Quartz e kgethwa bakeng sa ditekanyo tsa UV ka lebaka la ho pepeneneng ha yona kganyeng ya UV.
4. Sesupa-tsela: Hangata ke tšubu e eketsang khanya (PMT) kapa sesebelisoa se kopantsoeng ka tjhaja (CCD) se lekanyang matla a khanya e fetang sampole.
5. Yuniti ea Ts'ebetso ea Lintlha: Khomphutha kapa microprocessor e sebetsana le matšoao a optical, e fetola data ea monya hore e be mahloriso kapa tlhahisoleseling e 'ngoe e amehang.
dikopo
1. Tlhahlobo ea Bongata:
E 'ngoe ea mekhoa e ka sehloohong ea ho sebelisa spectrophotometry ea UV-Vis ke ho lekanya lintho. E sebelisoa haholo lilaboratoring tsa bongaka ho fumana maemo a tsoekere, k'holeseterole le urea lisampoleng tsa mali ka lebaka la ho nepahala ha eona le nako ea karabelo e potlakileng. Ka mokhoa o ts'oanang, bo-rasaense ba tikoloho ba lekanya bongata ba litšila tse kang nitrate le phosphate metsing.
2. Tlhahlobo ea Boleng:
Ntle le ho lekanya lintho, spectrophotometry ea UV-Vis e ka thusa ho khetholla metsoako ka li-spectra tsa eona tse ikhethang tsa ho monya. Sena se bohlokoa haholo indastering ea meriana bakeng sa ho netefatsa boitsebiso ba thepa e tala le lihlahisoa tse felileng.
3. Lithuto tsa Kinetics:
Spectrophotometry ea UV-Vis e bohlokoa haholo ho ithuteng kinetics ea karabelo. Ka ho beha leihlo phetoho ea monya maqhubu a itseng ha nako e ntse e ea, bafuputsi ba ka fumana sekhahla sa karabelo le mekhoa.
4. Tlhahlobo ea Sebopeho le Mesebetsi:
Litsebi tsa baeloji le litsebi tsa baeloji ea limolek'hule li sebelisa spectrophotometry ea UV-Vis ho ithuta li-nucleic acid le liprotheine. Mohlala, ho monngoa ha 260 nm le 280 nm ho sebelisoa ho fumana bohloeki le mahloriso a DNA le RNA, ha mahloriso a protheine a atisa ho lekanngoa ho sebelisoa teko ea Bradford.
5. Saense ea Lisebelisoa:
Mokhoa ona o boetse oa bohlokoa saenseng ea thepa bakeng sa ho khetholla litšobotsi tsa optical tsa lintho. O thusa ho fumana matla a lekhalo la band ho li-semiconductor le bohloeki ba optical ba likristale.
6. Likopo tsa Liindasteri:
Liindastering tse kang lijo le lino, spectrophotometry ea UV-Vis e netefatsa taolo ea boleng ka ho lekanya bongata ba metsoako le litšila tse itseng. Ka mokhoa o ts'oanang, indastering ea masela, e hlahloba lebelo la 'mala oa masela.
Melemo le Mefokolo
Melemo:
1. Bonolo le Lebelo: Mokhoa ona o bonolo ebile o potlakile, o fana ka data ea nako ea sebele ntle le tlhoko ea ho lokisa sampole ka botlalo.
2. Bongata le Boleng: Spektrophotometry ea UV-Vis e fana ka tlhahlobo ea bongata le ea boleng, e leng se etsang hore e be le mefuta e fapaneng.
3. Ha e senye: Mokhoa ona ha o senye, ho bolelang hore sampole e ka fumanoa hape kamora tlhahlobo.
4. E bolokang tjhelete: Ha e bapiswa le mekgwa e meng ya tlhahlobo e kang NMR kapa mass spectrometry, UV-Vis spectrophotometry e bolokang tjhelete haholo ebile e fumaneha habonolo.
5. Tšebeliso e pharaletseng: E ka sekaseka mefuta e mengata ea lintho, ho tloha ho li-ion tse sa tloaelehang ho ea ho limolek'hule tse rarahaneng tsa lintho tse phelang.
Meeli:
1. Ho se utloisisehe: Le hoja e le bonolo haholo, spectrophotometry ea UV-Vis e kanna ea se ke ea lemoha lintho ka mahloriso a tlase haholo ha e bapisoa le mekhoa e kang fluorescence spectroscopy.
2. Litšitiso: Boteng ba mefuta e meng e monyang sampole bo ka lebisa litšitisong tsa spectral, e leng se thatafatsang tlhahlobo.
3. E Lekanyelitsoe ho Disampole tsa Metsi: Mokhoa ona o loketse haholo-holo disampole tsa metsi, leha disampole tse tiileng li ka hlahlojoa ka lisebelisoa tsa ho bonahatsa tse hasaneng.
Tsoelo-pele ea Haufinyane le Litaelo tsa Kamoso
Tsoelo-pele ho spectrophotometry ea UV-Vis e lebisitse ho nepahaleng ho ntlafetseng, kutloelo-bohlokong le boiketlong. Mekhoa e mecha e kang spectrophotometers ea micro-volume e lumella tlhahlobo ea meqolo ea lisampole tsa metsotso, e leng ea bohlokoa haholo masimong a kang genomics le proteomics. Ho phaella moo, ho kopanngoa le software bakeng sa pokello ea data e iketsahalletseng le tlhahlobo ho nolofalitse ts'ebetso libakeng tse nang le phallo e phahameng.
Ha re sheba pele, ho kopanngoa ha spectrophotometry ea UV-Vis le mekhoa e meng ea tlhahlobo, joalo ka chromatography le spectrometry ea bongata, ho tšepisa ho fana ka litharollo tse felletseng tsa tlhahlobo ea mahlakore a mangata. Ho feta moo, ho fokotsa li-spectrophotometer le nts'etsopele ea li-unit tse nkehang habobebe, tse ka sebelisoang tšimong ho tla atolosa sebaka sa ts'ebeliso, haholo-holo tlhokomelong ea tikoloho le tlhahlobo ea libaka tsa tlhokomelo.
fihlela qeto e
Spektrophotometer ea UV-Vis e ntse e le lejoe la motheo la k'hemistri ea tlhahlobo, e bapala karolo ea bohlokoa lipatlisisong tsa mahlale, lits'ebetsong tsa indasteri le ho latela melao. Bokhoni ba eona ba ho fana ka tlhahlobo e potlakileng, e nepahetseng, le e sa senyeheng bo e etsa sesebelisoa sa bohlokoa masimong a fapaneng. Ha tsoelo-pele ea theknoloji e ntse e tsoela pele ho ntlafatsa bokhoni ba eona, bohlokoa le ts'ebeliso ea spectrophotometer ea UV-Vis li ikemiselitse ho hola le ho feta, li tiisa boemo ba eona nakong e tlang ea mahlale a tlhahlobo.
