Dengės karštinės diagnostikos metodai
Pendahuluanas
Denge hemoraginė karštligė (DHK) yra virusinė liga, perduodama įkandus uodams Aedes aegypti ir Aedes albopictus. Denge virusą, sukeliantį HKK, sudaro keturi serotipai: DENV-1, DENV-2, DENV-3 ir DENV-4. Ši liga yra didelė sveikatos problema daugelyje atogrąžų ir subtropikų šalių, įskaitant Indoneziją. Todėl greiti ir tikslūs diagnostikos metodai yra labai svarbūs šiai ligai nustatyti ir valdyti. Šiame straipsnyje bus apžvelgti įvairūs diagnostikos metodai, naudojami denge hemoraginei karštligei nustatyti.
Klinikinės Denge karštligės apraiškos
Prieš aptariant diagnostikos metodus, svarbu suprasti dengės karštinės klinikinius požymius. Dengės karštinės simptomai paprastai pasireiškia po 4–10 dienų inkubacinio laikotarpio po uodo įkandimo. Pradiniai simptomai yra staigus karščiavimas, stiprus galvos skausmas, skausmas už akių, raumenų ir sąnarių skausmas, pykinimas, vėmimas ir odos bėrimas. Sunkiais atvejais liga gali progresuoti iki dengės hemoraginės karštinės su savaiminiu kraujavimu ir dengės šoko sindromu, kuris gali būti pavojingas gyvybei.
Diagnostiniai metodai
1. Klinikinė diagnostika
Pirmasis dažnai naudojamas metodas yra klinikinė diagnozė . Ši diagnozė pagrįsta tipiniais paciento rodomais dengės karštinės simptomais ir požymiais. Iš pradžių gydytojas atliks anamnezę ir fizinę apžiūrą, kad nustatytų tokius simptomus kaip aukšta temperatūra, sąnarių skausmas, bėrimas ir kiti klasikiniai požymiai. Tačiau ši klinikinė diagnozė dažnai yra subjektyvi ir jai trūksta specifiškumo, todėl ją reikia patvirtinti laboratoriniais tyrimais.
2. Hematologinis tyrimas
Denge karštligės pacientams keli specifiniai hematologiniai parametrai rodo reikšmingus pokyčius. Trombocitų skaičius yra vienas svarbiausių hematologinių tyrimų. Trombocitopenija (sumažėjęs trombocitų skaičius) yra dažnas denge karštligės pacientų požymis. Be to, gali pasireikšti leukopenija (sumažėjęs baltųjų kraujo kūnelių skaičius) ir hemokoncentracija (padidėjęs hematokritas).
3. Serologinis tyrimas
Serologiniai tyrimai naudojami siekiant nustatyti antikūnų, kuriuos organizmas gamina reaguodamas į dengės viruso infekciją, buvimą . Du pagrindiniai serologinių tyrimų metodai yra šie:
– IgM ir IgG ELISA: imunofermentinis tyrimas (ELISA) yra dažnai naudojamas metodas IgM ir IgG antikūnams paciento kraujyje nustatyti. IgM paprastai atsiranda praėjus 3–5 dienoms po simptomų atsiradimo ir išnyksta per kelis mėnesius, o IgG atsiranda vėliau ir gali išlikti visą gyvenimą. IgM nustatymas rodo ūminę dengės karštligės infekciją, o IgG – ankstesnę arba pasikartojančią infekciją.
– Greitieji diagnostiniai testai (RDT): šie imunochromatografija pagrįsti greitieji testai leidžia greitai ir lengvai aptikti IgM ir IgG antikūnus. Nors RDT yra mažiau jautrūs ir specifiški nei ELISA, jie dažnai naudojami lauko sąlygomis arba vietovėse, kuriose yra ribota laboratorinė įranga.
4. NS1 antigeno aptikimas
NS1 (nestruktūrinis baltymas 1) yra baltymas, kurį ūminės infekcijos metu gamina dengės virusas ir kuris gali būti aptinkamas paciento kraujyje nuo pirmos simptomų dienos. NS1 antigeno nustatymas naudojant NS1 antigeno greitojo testo rinkinį arba ELISA, gali padėti anksti diagnozuoti ligą dar prieš pasirodant IgM antikūnams. Šis metodas suteikia ankstyvos dengės karštligės pacientų diagnostikos ir greito gydymo pranašumą.
5. Atvirkštinės transkripcijos polimerazės grandininė reakcija (RT-PGR)
RT-PGR yra labai jautrus ir specifiškas molekulinis metodas dengės viruso genetinei medžiagai aptikti. Šis procesas apima virusinės RNR pavertimą komplementaria DNR (kDNR) naudojant atvirkštinės transkriptazės fermentą, o po to kDNR amplifikaciją naudojant PGR. RT-PGR gali labai tiksliai aptikti visus keturis dengės viruso serotipus ir suteikia informacijos apie viruso kiekį paciento organizme. Nepaisant didelio jautrumo ir specifiškumo, pagrindiniai jos apribojimai yra brangios įrangos ir kvalifikuoto personalo poreikis, kurio gali būti ne visose sveikatos priežiūros įstaigose.
6. Izoterminės amplifikacijos metodai
Izoterminės amplifikacijos metodai, tokie kaip kilpinė izoterminė amplifikacija (LAMP), yra PGR alternatyva, kurią galima atlikti nenaudojant sudėtingos laboratorinės įrangos. LAMP yra DNR amplifikacijos technika, veikianti pastovioje temperatūroje, todėl ji yra paprastesnė ir greitesnė nei PGR. Įrodyta, kad LAMP yra veiksmingas aptinkant dengės virusą ir gali būti taikomas ribotų išteklių aplinkoje.
7. Priežiūros vietos (PoC) metodas
Priežiūros vietoje naudojami diagnostikos prietaisai yra skirti naudoti tiesiogiai paciento priežiūros vietoje , suteikiantys greitus rezultatus, nereikalaujant klinikinės laboratorijos. Greitosios diagnostikos prietaisų pavyzdžiai yra įvairūs greitosios diagnostikos testai (RDT) ir NS1 antigeno rinkiniai. Greitosios diagnostikos prietaisai gali pagerinti diagnozės nustatymo ir pacientų priežiūros greitį, ypač atokiose vietovėse arba protrūkių metu.
Dengės karštinės diagnozės iššūkiai
Nors yra įvairių diagnostikos metodų, vis dar kyla iššūkių užtikrinant greitą, tikslią ir ekonomišką dengės karštinės diagnozę. Kai kurie iš šių iššūkių:
– Klinikinis kintamumas: Denge karštligės simptomai dažnai primena kitų ligų simptomus, ypač ankstyvosiose stadijose. Dėl to be laboratorinės pagalbos sunku nustatyti klinikinę diagnozę.
– Laboratorinių tyrimų apribojimai: daugelyje endeminių sričių ne visada yra laboratorinių tyrimų, tokių kaip RT-PGR, įranga. Labai svarbu naudoti greitus ir pigesnius metodus.
– Jautrumas ir specifiškumas: serologiniai tyrimai ir PoC rinkiniai ne visada gali pasižymėti pakankamu jautrumu ir specifiškumu, ypač ankstyvosiose infekcijos stadijose arba antrinių infekcijų, kurias sukelia skirtingi virusų tipai, atveju.
– Kaina: Kai kuriems diagnostikos metodams, ypač molekuliniams, pavyzdžiui, RT-PGR, reikia didelių išteklių, susijusių su įranga ir sąnaudomis, o tai gali būti neįmanoma visose aplinkose.
Denge karštligės diagnostikos ateities kryptys
Sėkmė kovojant su dengės karštine priklauso ne tik nuo ankstyvo aptikimo ir paciento priežiūros, bet ir nuo viruso perdavimo prevencijos bei kontrolės. Todėl greitesnių, tikslesnių, pigesnių ir plačiau prieinamų diagnostikos metodų kūrimas yra šios srities mokslinių tyrimų prioritetas.
Būsimi metodai gali apimti nanotechnologijomis pagrįstų biosensorių kūrimą, integruotas diagnostikos platformas, kurios sujungia kelis tyrimus viename įrenginyje, ir pažangesnes genomikos pagrindu sukurtas diagnostikos technologijas, siekiant gauti išsamią informaciją apie virusą ir paciento reakciją.
Išvada
Denge hemoraginė karštligė yra liga, kuriai reikalingas greitas ir tinkamas gydymas. Sukurta įvairių diagnostikos metodų denge viruso infekcijai nustatyti, kiekvienas iš jų turi savų privalumų ir trūkumų. Serologiniai tyrimai, NS1 antigeno nustatymas ir molekuliniai metodai, tokie kaip RT-PGR, yra vienos iš pagrindinių denge diagnostikos priemonių. Diagnostikos iššūkių vis dar yra, tačiau technologinės naujovės ir toliau gerina diagnozės tikslumą, greitį ir prieinamumą. Bendradarbiavimas tarp mokslininkų, sveikatos priežiūros paslaugų teikėjų ir politikos formuotojų yra labai svarbus veiksmingai denge diagnostikai ir kontrolei.
