Усулҳои муайян кардани бемориҳои бактериявӣ
Бемориҳои бактериявӣ ҳамчун як мушкили асосӣ дар саломатии инсон, ҳайвонот ва растаниҳо боқӣ мемонанд. Сироятҳои бактериявӣ метавонанд аломатҳои сабукро ба вуҷуд оранд, ки ба ҳаёт таҳдид мекунанд, вобаста ба намуди бактерияҳо, макони сироят, вазъи масунияти бемор ва суръати табобат. Аз ин рӯ, муайян кардани дақиқ ва зуди бемориҳои бактериявӣ барои табобати муваффақ, махсусан дар давраи афзоиши муқовимати зиддимикробӣ, муҳим аст. Дар ин мақола усулҳои гуногуни муайян кардани бемориҳои бактериявӣ, аз равишҳои клиникӣ то усулҳои муосири лаборатории молекулавӣ, баррасӣ мешаванд.
1. Муайянкунӣ дар асоси нишонаҳои клиникӣ ва таърихи бемор
Қадами аввал дар муайян кардани бемории бактериявӣ одатан бо арзёбии клиникӣ оғоз мешавад. Духтур ё мутахассиси соҳаи тандурустӣ нишонаҳо ва аломатҳо, аз қабили табларза, дарди маҳаллӣ, сулфаи пурқувват, дарунравӣ, захмҳои чиркин ва нишонаҳои сепсисро арзёбӣ мекунад. Ғайр аз ин, таърихи бемор, аз ҷумла таърихи сафар, истеъмоли баъзе хӯрокҳо, тамос бо шахсони сироятшуда, таъсири муҳити зист (об, хок), истифодаи қаблии антибиотикҳо ё амалиётҳои тиббӣ, ба монанди гузоштани катетер, муҳим аст.
Гарчанде ки муҳим аст, равиши клиникӣ маҳдудиятҳо дорад. Бисёре аз бемориҳои бактериявӣ нишонаҳои монанд ба сироятҳои вирусӣ ё замбуруғӣ доранд, аз ин рӯ ташхиси танҳо бар асоси нишонаҳо аксар вақт нодуруст аст. Аз ин рӯ, барои тасдиқи патогени сабабгор санҷишҳои иловагӣ заруранд.
2. Таҳқиқоти микроскопӣ: Рангкунии Грам ва дигар усулҳо
Як усули классикӣ, вале то ҳол хеле муфид ташхиси микроскопӣ мебошад. Усули маъмултарин рангкунии Грам мебошад, ки бактерияҳоро ба Грам-мусбат (арғувонӣ) ва Грам-манфӣ (гулобӣ) ҷудо мекунад. Ин маълумот барои пешгӯии намуди бактерия ва муайян кардани интихоби аввалияи антибиотикҳо пеш аз дастрас шудани натиҷаҳои парвариш кӯмак мекунад.
Намунаҳое, ки бо истифода аз рангкунии Грам таҳқиқ карда мешаванд, балғам, хун (дар баъзе ҳолатҳо), моеъи мағзи сар, тампонҳои захм, моеъи плевра ё пешобро дар бар мегиранд. Илова бар рангкунии Грам, инчунин рангкунии махсусгардонидашуда ба монанди Ziehl-Neelsen барои бактерияҳои ба кислота тобовар (масалан, Mycobacterium tuberculosis) ва рангкунии флуоресцентӣ дар баъзе ҳолатҳо мавҷуданд.
Бартариҳои муоинаи микроскопӣ дар он аст, ки он зуд ва нисбатан арзон аст. Аммо, ҳассосияти он аз шумораи бактерияҳо дар намуна ва сифати намуна вобаста аст. Ғайр аз ин, на ҳама бактерияҳоро танҳо аз рӯи шакли худ ба осонӣ дидан ё фарқ кардан мумкин аст.
3. Кишоварзии бактериявӣ: Стандарти тиллоӣ барои муайянкунӣ
Кишти зироат аксар вақт "стандарти тиллоӣ" барои ташхиси бемориҳои бактериявӣ ҳисобида мешавад. Намунаҳои клиникӣ дар муҳити мушаххас парвариш карда мешаванд, то бактерияҳо ба онҳо имкон диҳанд, ки афзоиш ёбанд ва сипас дар асоси хусусиятҳои колония, санҷишҳои биохимиявӣ ва намунаҳои афзоиш муайян карда мешаванд.
Муҳити парвариш метавонад умумӣ (масалан, агари хун, агари ғизоӣ) ё интихобӣ-дифференсиалӣ (масалан, агари МакКонки барои бактерияҳои грам-манфии рӯда) бошад. Пас аз он ки бактерияҳо афзоиш ёбанд, лаборатория метавонад як қатор санҷишҳои биохимиявиро, аз қабили каталаза, коагулаза, оксидаза, ферментатсияи шакар ва ғайраро анҷом диҳад.
Бартарии парвариш дар он аст, ки он қобилияти тасдиқи бактерияҳои зинда ҳамчун сабаби сироят аст ва имкон медиҳад, ки санҷишҳои минбаъда, ба монанди санҷиши ҳассосияти антибиотикҳо, анҷом дода шаванд. Камбудиҳо вақти заруриро дар бар мегиранд (одатан 24-72 соат, ҳатто барои баъзе бактерияҳо дарозтар) ва на ҳама бактерияҳо ба осонӣ парвариш карда мешаванд (ҳассос) ё ба шароити махсус ниёз доранд.
4. Санҷиши ҳассосият ба антибиотикҳо
Муайян кардани бемориҳои бактериявӣ танҳо бо номгузории бактерияҳо маҳдуд намешавад. Дар бисёр мавридҳо, донистани он ки кадом антибиотикҳо самараноканд, муҳимтар аст. Санҷиши ҳассосияти антибиотикҳо пас аз ҷудо кардани бактерияҳо тавассути парвариш анҷом дода мешавад.
Баъзе усулҳои маъмулан истифодашаванда:
– Диффузияи диск (Кирби-Бауэр): минтақаи ингибисияи атрофи диски антибиотикро меомӯзад.
– MIC (Консентратсияи ҳадди ақали ингибиторӣ): пасттарин консентратсияи антибиотикеро, ки афзоиши бактерияҳоро бозмедорад, одатан тавассути усули обёрӣ ё озмоиши E муайян мекунад.
– Санҷиши автоматии ҳассосият: бо истифода аз абзорҳои автоматикунонидашуда, ки зудтар ва систематиктаранд.
Натиҷаҳои ин санҷишҳо ба духтурон дар интихоби терапияи мувофиқтарин, кам кардани истифодаи нолозими антибиотикҳои васеъспектр ва кам кардани хатари муқовимат кӯмак мерасонанд.
5. Усулҳои серологӣ: Муайян кардани антителоҳо ё антигенҳо
Дар баъзе бемориҳо, усулҳои серологӣ барои муайян кардани антителоҳое, ки бадан бар зидди бактерияҳо истеҳсол мекунад ё антигенҳои бактериявӣ истифода мешаванд. Мисолҳои ин татбиқ таби тиф (баъзе санҷишҳо), Helicobacter pylori (якчанд санҷишҳо) ё сироятҳоеро дар бар мегиранд, ки парвариши онҳо душвор аст.
Бартарии серология дар он аст, ки он метавонад вокуниши масуниятро ҳатто вақте ки шумораи бактерияҳо кам ё ҷудо карданаш душвор аст, муайян кунад. Аммо, тафсири серология душвор буда метавонад, зеро антителоҳо метавонанд пас аз бартараф шудани сироят муддати тӯлонӣ боқӣ монанд, аз ин рӯ онҳо на ҳамеша сирояти фаъолро нишон медиҳанд. Аз ин рӯ, серология одатан ҳамчун илова ба маълумоти клиникӣ ва дигар санҷишҳо истифода мешавад.
6. Санҷишҳои ташхиси фаврӣ
Пешрафтҳои технологӣ як қатор санҷишҳои фавриро фароҳам овардаанд, ки метавонанд дар муассисаҳои тиббӣ бо натиҷаҳои зуд анҷом дода шаванд. Санҷишҳои фаврӣ одатан ба иммунохроматография (монанд ба тасмаҳои санҷишӣ) барои муайян кардани антигенҳои бактериявӣ ё ҷузъҳои мушаххас асос ёфтаанд.
Намунаҳои санҷишҳои фаврӣ муайян кардани стрептококкҳо дар гулӯ дард ё антигенҳои мушаххас дар намунаҳои клиникӣ мебошанд. Бартарии асосии онҳо суръат аст, ки имкон медиҳад қарорҳои фаврии табобатӣ қабул карда шаванд. Аммо, ҳассосият ва мушаххасияти онҳо вобаста ба бренди дастгоҳ, сифати намуна ва марҳилаи беморӣ метавонад фарқ кунад.
7. Усулҳои молекулавӣ: PCR ва вариантҳои он
Усулҳои молекулавӣ аҳамияти рӯзафзун пайдо мекунанд, зеро онҳо метавонанд маводи генетикии бактериявӣ (ДНК/РНК)-ро бо ҳассосияти баланд муайян кунанд. Усули маъмултарин PCR (Реаксияи занҷираи полимеразӣ) мебошад, ки PCR-и вақти воқеиро дар бар мегирад, ки метавонад натиҷаҳои зудтарро таъмин кунад ва имкони муайянкунии нисбиро фароҳам оварад.
PCR барои бактерияҳои душворфарҳанг, ҳолатҳое, ки ташхиси фавриро талаб мекунанд ва ҳолатҳое, ки бемор аллакай антибиотикҳо гирифтааст, ки эҳтимолан ба фарҳанги манфӣ оварда мерасонад, муфид аст. Илова бар PCR-и ягона, PCR-и мултиплексӣ низ дастрас аст, ки метавонад ҳамзамон якчанд патогенҳоро, масалан, дар панелҳои сироятҳои роҳи нафас ё меъдаву рӯда, муайян кунад.
Камбудиҳои усулҳои молекулавӣ хароҷоти баландтар, ниёз ба таҷҳизот ва кормандони омӯзонидашуда ва он далел, ки PCR метавонад ДНК-и бактерияҳои мурдаро муайян кунад, аз ин рӯ, он бояд дар заминаи клиникӣ бо эҳтиёт шарҳ дода шавад.
8. Муайянкунӣ дар асоси MALDI-TOF MS
MALDI-TOF (Десорбсияи лазерӣ/ионизатсияи вақти парвоз бо ёрии матритса) як технологияи муосир аст, ки бактерияҳоро дар асоси "изҳои ангушт"-и сафеда муайян мекунад. Пас аз гирифтани изоляти бактериявӣ аз фарҳанг, MALDI-TOF метавонад дар давоми чанд дақиқа муайян кунад.
Бартариҳои он суръат, дақиқӣ барои доираи васеи бактерияҳо ва самаранокӣ барои озмоишгоҳҳое, ки ҳаҷми зиёди намуна доранд, дар бар мегиранд. Бо вуҷуди ин, таҷҳизот гарон аст ва барои аксари расмиёт марҳилаи пешакии парваришро талаб мекунад, гарчанде ки баъзе таҳаввулот имкон медиҳанд, ки намунаҳои мушаххас мустақиман татбиқ карда шаванд.
9. Сиквенсиякунии генетикӣ ва метагеномӣ
Барои ҳолатҳои мураккаб, хусусан вақте ки муайян кардани патоген душвор аст, усулҳои секвенсиякунӣ, ба монанди секвенсиякунии rRNA-и 16S ё секвенсиякунии тамоми геном, метавонанд истифода шаванд. Ин усулҳо имкон медиҳанд, ки бактерияҳо то намуд ва ҳатто сатҳи штамм муайян карда шаванд, инчунин генҳои муқовимат муайян карда шаванд.
Метагеномика (масалан, пайдарпайии насли оянда мустақиман аз намунаҳои клиникӣ) метавонад доираи васеи микроорганизмҳоро бидуни ниёз ба парвариш муайян кунад. Ин равиш барои сироятҳои шадиди ташхиснашуда, сепсиси манфии фарҳангӣ ё сироятҳои омехта умеди калон дорад. Мушкилот арзиши баланд, талаботи биоинформатика ва хатари олудашавӣ, ки метавонанд ба тафсир таъсир расонанд, дар бар мегиранд.
Хулоса
Усулҳои муайян кардани бемориҳои бактериявӣ, аз усулҳои анъанавӣ, ба монанди рангкунӣ ва парвариши Грам то усулҳои муосир, ба монанди PCR, MALDI-TOF ва секвенсия, таҳаввул ёфта истодаанд. Ҳеҷ як усул барои ҳама ҳолатҳо ҳамеша беҳтарин нест. Интихоби усул аз намуди сироят, намунаҳои мавҷуда, таъҷилӣ, захираҳои лабораторӣ ва ҳадафҳои клиникӣ (масалан, муайянкунии оддӣ ё санҷиши муқовимати ҳамзамон) вобаста аст. Якҷоя кардани арзёбии дурусти клиникӣ ва усулҳои мувофиқи лабораторӣ боиси ташхиси дақиқ, дастгирии истифодаи оқилонаи антибиотикҳо ва дар ниҳоят беҳтар кардани бехатарии бемор ва сифати нигоҳубин мегардад.
