Усулҳои муайян кардани паразит дар ҳайвонот
Паразит организмест, ки дар дохили мизбон ё дар дохили он зиндагӣ мекунад ва ба мизбони худ дар шакли беморӣ ё дигар ранҷу азоб зарар мерасонад. Муайян кардани паразитҳо дар ҳайвонот як қадами муҳим дар тибби байторӣ ва идоракунии саломатии чорво мебошад, ки пешгирӣ ва идоракунии сироятҳои паразитӣ мебошад, ки метавонанд ба саломатӣ ва ҳосилнокии ҳайвонот зарар расонанд. Барои муайян кардани паразитҳо дар ҳайвонот якчанд усул истифода мешавад ва дар ин мақола ин усулҳо муфассал баррасӣ карда мешаванд.
Микроскопӣ
Усулҳои микроскопӣ яке аз усулҳои маъмултарини муайян кардани паразитҳо дар ҳайвонот мебошанд. Ин усул омӯзиши намунаҳои биологӣ ба монанди хун, наҷосат, пӯст ё бофтаҳоеро дар бар мегирад, ки гумон меравад, ки дорои паразитҳо бошанд.
1. Таҳлили тамғаҳои хун: Ин санҷиш аксар вақт барои муайян кардани паразитҳои хун, аз қабили протозоа (масалан, Плазмодий, ки боиси вараҷа мегардад) ва намудҳои гуногуни кирмҳо анҷом дода мешавад. Намунаи хун аз ҳайвон гирифта мешавад ва сипас ба шишаи слайд тунук молида, бо ранги махсус (масалан, Гиемса ё Райт) ранг карда мешавад ва сипас зери микроскоп тафтиш карда мешавад.
2. Муоинаи наҷосат: Муоинаи наҷосат аксар вақт барои муайян кардани паразитҳои рӯда, ба монанди кирмҳои мудаввар, кирмҳои тасмашакл ва протозоа истифода мешавад. Усулҳо ба монанди флотатсия ё седиментатсия барои ҷудо кардани тухмҳои паразит ё ооцистҳо аз дигар моддаҳои наҷосат истифода мешаванд, ки сипас бо микроскоп тафтиш карда мешаванд.
3. Харошидани пӯст: Ин усул барои муайян кардани паразитҳои пӯст, ба монанди канаҳо, истифода мешавад. Дар минтақаи гумонбаршуда харошидани пӯст анҷом дода мешавад ва намуна таҳти микроскоп тафтиш карда мешавад.
Серологӣ
Санҷиши серологӣ муайян кардани антигенҳо ё антителоҳоро ба паразитҳо дар зардоби ҳайвонот дар бар мегирад. Ин усул барои муайян кардани сироятҳои паразитӣ, ки ташхиси онҳо мустақиман тавассути микроскопия душвор аст, муфид аст.
1. ELISA (Таҳлили иммуносорбентии бо фермент алоқаманд): Ин усул барои муайян ва чен кардани антителоҳо ё антигенҳои паразит дар зардоб истифода мешавад. Принсипи асосии ELISA дар он аст, ки антигенҳо ё антителоҳои мушаххас ба сатҳе, ки бо антиген ё антителои мушаххас пӯшонида шудааст, пайваст мешаванд ва сипас муайянкунӣ тавассути реаксияи ферментативӣ сурат мегирад, ки тағирёбии рангро ба вуҷуд меорад, ки онро миқдоран чен кардан мумкин аст.
2. Таҳлили иммунофлуоресцентӣ (IFA): IFA истифодаи антителоҳоеро дар бар мегирад, ки бо флуорохромҳо нишонгузорӣ шудаанд, то мавҷудияти паразитҳоро дар намуна муайян кунанд. Вақте ки антитело ба антигени паразит пайваст мешавад, ин комплексро зери микроскопи флуоресцентӣ мушоҳида кардан мумкин аст.
Молекулӣ
Усулҳои молекулавӣ дар муайян кардани паразитҳо маъруфият пайдо мекунанд, зеро онҳо ҳассосият ва хосияти баландро пешниҳод мекунанд. Ин равиш таҳлили ДНК ё РНК-и паразитро дар бар мегирад.
1. Реаксияи занҷирии полимеразӣ (PCR): PCR як усули молекулавӣ аст, ки барои тақвияти пораҳои мушаххаси ДНК аз паразитҳо истифода мешавад ва имкон медиҳад, ки ҳатто дар миқдори хеле кам муайян карда шавад. Ин усул махсусан барои муайян кардани паразитҳое, ки муайян кардани онҳо бо истифода аз усулҳои анъанавӣ, ба монанди баъзе протозоаҳо ва вирусҳо, душвор аст, муфид аст.
2. PCR-и вақти воқеӣ (qPCR): Ин усул такмилёфта аз PCR-и анъанавӣ буда, имкон медиҳад, ки ДНК-и паразит дар намуна дар вақти воқеӣ чен карда шавад. qPCR аз ҷиҳати суръат ва миқдорӣ бартариҳо дорад ва барои скрининги миқёси калон мувофиқтар аст.
3. Пайдарпайӣ: Пайдарпайии ДНК маълумоти муфассалро дар бораи геноми паразит медиҳад. Пайдарпайӣ метавонад намудҳои паразитро дар асоси пайдарпайии нуклеотидҳо дар ДНК ё РНК-и онҳо муайян кунад. Бо пешрафт дар технология, пайдарпайии геномӣ дастрастар шудааст ва барои муайян ва омӯзиши амиқтари паразитҳо истифода мешавад.
Гистопатологӣ
Гистопатология ташхиси микроскопии бофтаҳои фишурда ва рангкардашударо барои муайян кардани осеб ё тағйироте, ки аз ҷониби паразитҳо ба вуҷуд омадаанд, дар бар мегирад. Ин усул махсусан барои омӯзиши сироятҳои паразитӣ, ки ба бофтаҳои дарунии ҳайвонот таъсир мерасонанд, муфид аст.
1. Гистология: Ташхиси гистологӣ гирифтани намунаи бофтаро, одатан тавассути биопсия, ва сипас коркарди онро барои ташхис таҳти микроскоп дар бар мегирад. Рангҳои махсус, ба монанди гематоксилин ва эозин (H&E), аксар вақт барои равшан кардани сохтори паразит ва тағйироти гистологӣ дар бофтаи мизбон истифода мешаванд.
2. Иммуногистохимия (IHC): IHC усулест, ки антителоҳои мушаххасеро истифода мебарад, ки ба антигенҳои паразит дар бофта пайваст мешаванд. Ин имкон медиҳад, ки паразитҳо дар доираи васеътари бофта муайян карда шаванд ва дар бораи макон ва таъсири сироятёбии паразит дар мизбон маълумот дода шавад.
маданият
Баъзе паразитҳоро метавон дар лаборатория барои муайян кардан ва омӯзиши минбаъда парвариш кард.
1. Парвариши протозоаҳо: Протозоаҳо ба монанди Giardia ва Trichomonas-ро метавон дар муҳити махсусе парвариш кард, ки афзоиши онҳоро ҳавасманд мекунад. Ин парвариш имкон медиҳад, ки муайянкунии морфологии осонтар ба амал ояд ва таҳлили минбаъдаи молекулавиро дастгирӣ мекунад.
2. Парвариши буғумпоён: Баъзе буғумпоёнҳо, ба монанди канаҳо ва канаҳо, метавонанд дар шароити лабораторӣ барои муайян кардани морфологӣ ва таҳқиқоти эпидемиологӣ парвариш карда шаванд.
Усули ситометрияи ҷараёнӣ
Ситометрияи ҷараёнӣ як усули лабораторӣ мебошад, ки барои муайян ва чен кардани хусусиятҳои физикӣ ва химиявии ҳуҷайраҳо ё зарраҳое, ки аз ҷараёни моеъ мегузаранд, истифода мешавад. Гарчанде ки ин усул одатан дар таҳқиқоти ҳуҷайравӣ ва иммунологӣ истифода мешавад, онро инчунин барои муайян кардани паразитҳо истифода бурдан мумкин аст.
1. Иммунофенотипсозӣ: Дар заминаи паразитҳо, антителоҳои нишонгузоришуда метавонанд барои муайян кардани ҳуҷайраҳои мизбони сироятшуда ё намудҳои мушаххаси паразит дар асоси нишонаҳои мушаххаси сатҳӣ истифода шаванд.
2. Таҳлили ДНК: Ситометрияи ҷараёнӣ инчунин метавонад барои таҳлили мундариҷаи ДНК ва давраи ҳаёти паразитҳо истифода шавад ва дар бораи шумора ва марҳилаи инкишофи паразитҳо дар намуна маълумот диҳад.
Нишондиҳандаҳои генетикӣ ва биомолекулавӣ
Маркерҳои генетикӣ ва биомолекулавӣ барои муайян кардани мушаххаси паразитҳо ва штаммҳои онҳо истифода мешаванд.
1. RFLP (Полиморфизми дарозии порчаи маҳдудкунӣ): RFLP як усулест, ки буридани ДНК-ро бо ферментҳои маҳдудкунӣ ва таҳлили намунаи порчаҳои ДНК-ро дар бар мегирад. Ин усул барои фарқ кардани намудҳо ё штаммҳои паразит дар асоси тағирёбии геномҳои онҳо муфид аст.
2. Таҳлили микромоҳвора: Таҳлили микромоҳвора аз пайдарпайиҳои кӯтоҳ ва такроршавандаи ДНК барои фарқ кардани байни фардҳо ё популятсияҳои паразит истифода мебарад. Ин усул барои омӯзиши сохтори популятсия ва эпидемиологияи паразитҳо қарори баландро пешниҳод мекунад.
Бо ин усулҳои гуногун, муайян кардани паразитҳо дар ҳайвонот дақиқтар ва самараноктар шудааст. Маҷмӯи ин равишҳо аксар вақт барои таъмини ташхиси дуруст ва пешниҳоди маълумоти зарурӣ барои табобати муассир ва стратегияҳои мубориза бо паразитҳо истифода мешавад.